色譜柱使用溫度下限

　　前文說(shuō)到色譜柱使用溫度的上限，那么它有下限嗎？下限又是多少呢？下面就讓小編為您做個(gè)簡(jiǎn)單的介紹。

　　色譜柱使用溫度下限

　　關(guān)于使用的溫度下限，可能不少人不理解：溫度高了會(huì)燒壞好理解，溫度低了還會(huì)凍壞不成？

　　實(shí)際上，雖然不不至于凍壞，但低溫下確實(shí)會(huì)導(dǎo)致色譜柱性能嚴(yán)重?fù)p失。當(dāng)然，大部分情況下，這種性能損失是可逆的，溫度升上來(lái)就恢復(fù)了。

　　目前色譜固定相多數(shù)是聚合物。聚合物在不同溫度下宏觀表現(xiàn)為三種狀態(tài)：高溫下的黏流態(tài)（類似于液態(tài)）、低溫下的玻璃態(tài)或者結(jié)晶態(tài)（類似于固態(tài)）、以及介于兩者之間的黏彈態(tài)（橡膠的狀態(tài)，高分子*）。

　　對(duì)于固定相的使用，我們需要它處于黏流態(tài)，也就是融化的狀態(tài)。此時(shí)傳質(zhì)阻力小，容易獲得較高的柱效。如果溫度降低，固定相凝固成固態(tài)，保利能力和柱效都會(huì)顯著變差。不同聚合物的凝固溫度不一樣，所以有了不同的溫度下限。

　　一般非極性固定相不容易凝固，像DB-1、DB-5這類都能夠在-60℃使用，所以基本上不用考慮下限問(wèn)題。而極性強(qiáng)的固定相分子之間作用力強(qiáng)，更容易結(jié)晶凝固，所以zui低使用溫度普遍有限制。這里zui典型的就是聚乙二醇。

　　分子量2萬(wàn)的PEG熔點(diǎn)在55℃左右，所以早期文獻(xiàn)給出的PEG-20M的zui低使用溫度都是60℃。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)一些毛細(xì)管柱生產(chǎn)用的固定相還有傳統(tǒng)的PEG-20M，所以在使用上同樣存在溫度下限的問(wèn)題。

　　那么溫度低于這個(gè)下限會(huì)怎么樣呢？請(qǐng)看下面的圖：

　　PEG毛細(xì)管柱在60℃使用正常，降溫到50℃也沒(méi)事。再降溫到40℃就杯具鳥(niǎo)，不僅峰變寬，保留時(shí)間也變小了。

　　一般認(rèn)為，降溫提高保留時(shí)間和分離度，但是降到固定相的凝固點(diǎn)以下，就沒(méi)法有效保留了，傳質(zhì)阻力導(dǎo)致峰變寬。所以，用PEG柱（包括FFAP柱）的時(shí)候，千萬(wàn)不要盲目降柱溫。

　　這里還有一個(gè)奇怪的現(xiàn)象：前面說(shuō)PEG-20M的凝固點(diǎn)是55℃左右，但是上面的圖看到50℃用也沒(méi)事，降到40℃才不行。這是物理化學(xué)講相轉(zhuǎn)變時(shí)提到的過(guò)冷現(xiàn)象。PEG降溫到凝固點(diǎn)以下一點(diǎn)的時(shí)候并不馬上凝固，有一個(gè)過(guò)冷的介穩(wěn)狀態(tài)，所以在緩慢降溫到50℃時(shí)還能保持液態(tài)，仍然有分離效果。溫度降低很多才會(huì)凝固。